1.X'inhi l-kultura taċ-ċelluli?
Il-kultura taċ-ċelluli tirreferi għat-tneħħija taċ-ċelloli minn annimali jew pjanti u mbagħad it-tkabbir tagħhom f'ambjent artifiċjali favorevoli.Iċ-ċelloli jistgħu jittieħdu direttament mit-tessut u jitkissru b'mezzi enżimatiċi jew mekkaniċi qabel il-kultivazzjoni, jew jistgħu jiġu derivati minn linji ta 'ċelluli jew linji ta' ċelluli stabbiliti.
2.X'inhi l-kultura primarja?
Il-kultura primarja tirreferi għall-istadju tal-kultura wara li ċ-ċelloli jiġu separati mit-tessut u jipproliferaw taħt kundizzjonijiet xierqa sakemm jokkupaw is-sottostrati kollha disponibbli (jiġifieri jilħqu l-konfluwenza).F'dan l-istadju, iċ-ċelluli għandhom jiġu sottokultivati billi jiġu trasferiti f'kontenitur ġdid b'mezz ta 'tkabbir frisk biex jipprovdi aktar spazju għat-tkabbir kontinwu.
2.1 Linja taċ-ċelluli
Wara l-ewwel subkultura, il-kultura primarja tissejjaħ linja taċ-ċelluli jew subclone.Linji ta' ċelluli derivati minn kulturi primarji għandhom ħajja limitata (jiġifieri huma limitati; ara hawn taħt), u hekk kif jgħaddu, jiddominaw iċ-ċelloli bl-ogħla kapaċità ta' tkabbir, li jirriżultaw f'ċertu grad ta' ġenotip fil-popolazzjoni konsistenti mal-fenotip.
2.2 Razza taċ-ċelluli
Jekk sottopopolazzjoni ta 'linja taċ-ċelluli hija magħżula b'mod pożittiv mill-kultura permezz ta' klonazzjoni jew xi metodu ieħor, il-linja taċ-ċelluli ssir razza taċ-ċelluli.Ir-razez taċ-ċelluli normalment jakkwistaw bidliet ġenetiċi addizzjonali wara li tibda l-linja tal-ġenituri.
3.Linji taċ-ċelluli limitati u kontinwi
Ċelloli normali normalment jaqsmu biss numru limitat ta 'drabi qabel ma jitilfu l-abbiltà li jipproliferaw.Dan huwa avveniment determinat ġenetikament imsejjaħ senescence;dawn il-linji taċ-ċelluli jissejħu linji taċ-ċelluli finiti.Madankollu, xi linji taċ-ċelluli jsiru immortali permezz ta 'proċess imsejjaħ trasformazzjoni, li jista' jseħħ spontanjament jew jista 'jiġi indott minn kimiċi jew viruses.Meta linja taċ-ċelluli finiti tgħaddi minn trasformazzjoni u tikseb il-kapaċità li taqsam b'mod indefinit, issir linja taċ-ċelluli kontinwa.
4.Kultura kondizzjoni
Il-kundizzjonijiet tal-kultura ta 'kull tip ta' ċellula huma differenti ħafna, iżda l-ambjent artifiċjali għall-kultivazzjoni taċ-ċelloli huwa dejjem magħmul minn kontenitur adattat, li fih dan li ġej:
4.1 Substrat jew mezz ta’ kultura li jipprovdi nutrijenti essenzjali (aċidi amminiċi, karboidrati, vitamini, minerali)
4.2 Fatturi tat-tkabbir
4.3 Ormoni
4.4 Gassijiet (O2, CO2)
4.5 Ambjent fiżiku u kimiku regolat (pH, pressjoni osmotika, temperatura)
Il-biċċa l-kbira taċ-ċelloli huma dipendenti mill-ankraġġ u għandhom jiġu kkultivati fuq substrat solidu jew semi-solidu (kultura aderenti jew monosaff), filwaqt li ċelloli oħra jistgħu jikbru f'wiċċ l-ilma fil-medju (kultura ta 'sospensjoni).
5.Kriopreservazzjoni
Jekk ikun hemm ċelluli żejda fis-subkultura, għandhom jiġu ttrattati b'aġent protettiv xieraq (bħal DMSO jew gliċerol) u maħżuna f'temperatura taħt -130 ° C (krijopreservazzjoni) sakemm ikunu meħtieġa.Għal aktar informazzjoni dwar is-sottokultura u l-krijopreservazzjoni taċ-ċelloli.
6.Morfoloġija taċ-ċelloli fil-kultura
Iċ-ċelloli fil-kultura jistgħu jinqasmu fi tliet kategoriji bażiċi bbażati fuq il-forma u d-dehra tagħhom (jiġifieri l-morfoloġija).
6.1 Iċ-ċelloli tal-fibroblasts huma bipolari jew multipolari, għandhom forma tawwalija, u jikbru mwaħħla mas-sottostrat.
6.2 Ċelloli bħal epiteljali huma poligonali, għandhom daqs aktar regolari, u huma mwaħħla mal-matriċi f'folji diskreti.
6.3 Ċelloli li jixbħu lill-limfoblasti huma sferiċi u ġeneralment jikbru f'sospensjoni mingħajr ma jeħlu mal-wiċċ.
7.Applikazzjoni tal-kultura taċ-ċelluli
Il-kultura taċ-ċelluli hija waħda mill-għodod ewlenin użati fil-bijoloġija taċ-ċelluli u molekulari.Tipprovdi sistema mudell eċċellenti għall-istudju tal-fiżjoloġija normali u l-bijokimika taċ-ċelloli (bħal riċerka metabolika, tixjiħ), l-effetti tad-drogi u l-komposti tossiċi fuq iċ-ċelloli, u l-mutaġenesi u l-effetti karċinoġeniċi.Jintuża wkoll għall-iskrinjar u l-iżvilupp tad-droga u l-manifattura fuq skala kbira ta 'komposti bijoloġiċi (bħal vaċċini, proteini terapewtiċi).Il-vantaġġ ewlieni tal-użu tal-kultura taċ-ċelluli għal kwalunkwe waħda minn dawn l-applikazzjonijiet huwa l-konsistenza u r-riproduċibbiltà tar-riżultati li jistgħu jinkisbu bl-użu ta 'lott ta' ċelloli kklonati.
Ħin tal-post: Ġunju-03-2019