1.L-għażla tal-linja taċ-ċelluli t-tajba
Meta tagħżel il-linja taċ-ċelluli xierqa għall-esperiment tiegħek, jekk jogħġbok ikkunsidra l-kriterji li ġejjin:
a.Speċi: Linji ta 'ċelluli mhux umani u mhux primati normalment ikollhom inqas restrizzjonijiet ta' bijosigurtà, iżda fl-aħħar mill-aħħar l-esperiment tiegħek jiddetermina jekk tużax kultura ta 'speċi partikolari.
b.Karatteristiċi: X'inhu l-iskop tal-esperiment tiegħek?Pereżempju, linji taċ-ċelluli derivati mill-fwied u l-kliewi jistgħu jkunu aktar adattati għall-ittestjar tat-tossiċità.
c.Limitat jew kontinwu: Għalkemm l-għażla minn linja ta 'ċelluli limitata tista' tagħtik aktar għażliet biex tesprimi l-funzjoni korretta, linji ta 'ċelluli kontinwi huma ġeneralment aktar faċli biex jiġu kklonati u miżmuma.
d.Normali jew trasformati: Linji taċ-ċelluli trasformati ġeneralment ikollhom rata ta 'tkabbir ogħla u effiċjenza ogħla taż-żrigħ, huma kontinwi, u jeħtieġu inqas serum fil-medju tal-kultura, iżda l-fenotip tagħhom għadda minn bidliet permanenti permezz ta' trasformazzjoni ġenetika.
e.Kundizzjonijiet u karatteristiċi tat-tkabbir: X'inhuma r-rekwiżiti tiegħek għall-veloċità tat-tkabbir, id-densità tas-saturazzjoni, l-effiċjenza tal-klonazzjoni u l-abbiltà tat-tkabbir tas-sospensjoni?Pereżempju, biex tesprimi proteini rikombinanti f'rendiment għoli, jista 'jkollok bżonn tagħżel linji taċ-ċelluli li għandhom rati ta' tkabbir mgħaġġel u l-abbiltà li jikbru f'sospensjoni.
f.Kriterji oħra: Jekk qed tuża linja taċ-ċelluli limitata, hemm biżżejjed stokk disponibbli?Il-linja taċ-ċelluli hija kkaratterizzata bis-sħiħ, jew għandek tivverifikaha lilek innifsek?Jekk qed tuża linja taċ-ċelluli anormali, hemm linja taċ-ċelluli normali ekwivalenti li tista 'tintuża bħala kontroll?Il-linja taċ-ċelluli hija stabbli?Jekk le, kemm hu faċli li tikklonuha u tiġġenera biżżejjed stokk iffriżat għall-esperiment tiegħek?
2.Obtain linji taċ-ċelluli
Tista' tibni l-kultura tiegħek minn ċelloli primarji, jew tista' tagħżel li tixtri kulturi ta' ċelloli stabbiliti minn fornituri kummerċjali jew mingħajr skop ta' qligħ (jiġifieri banek taċ-ċelloli).Fornituri ta 'fama jipprovdu linji ta' ċelluli ta 'kwalità għolja li ġew ittestjati bir-reqqa għall-integrità u jiżguraw li l-kultura hija ħielsa minn kontaminanti.Nirrakkomandaw li ma tissellefx kulturi minn laboratorji oħra minħabba li għandhom riskju għoli ta 'kontaminazzjoni tal-kultura taċ-ċelluli.Irrispettivament mis-sors tiegħu, jekk jogħġbok kun żgur li l-linji taċ-ċelluli ġodda kollha ġew ittestjati għall-kontaminazzjoni tal-mikoplażma qabel tibda tużaha.
Ħin tal-post: Frar-01-2023